1) Dr. Tarcisio Barros (Brazil)

2) Dr. Andrey Bryukhovetskiy (Russia)

3) Dr. Samuil Rabinovich (Russia)

4) Dr. K-S Kang (South Korea)

5) Dr. Yoon Ha (South Korea)

6) Dr. Eva Sykova (Czech Republic)

7) Dr. Cornelis Kleinbloesem (Netherlands)

8) Dr. Yongfu Zhang (China)

9) Dr. Venceslav Bussarsky (Bulgaria)

10) Advance Cell Therapeutics (Switzerland)

11) Dr. Emilio Jacques (Mexico)

12) Medra (USA & Dominican Republic)

13) Dr. Geeta Shroff (India)

14) Dr. Satish Totey (India)

15) Dr. Robert Trossel (Netherlands)

16) Beike Biotechnology (China)

17) Dr. Gustavo Moviglia (Argentina)

18) Dr. R. Ravi Kumar (India)

19) Luis Geffner (Ecuador)

20) Tiantan Puhua Hospital (China)

СТВОЛОВЫЕ КЛЕТКИ

1) Др. Тарсизио Баррос и др. (Бразилия) вводил стволовые клетки, полученные из костного мозга, в спинномозговую артерию рядом с местом повреждения 32 пациентам с клинически полными повреждениями спинного мозга (2-12 лет после травмы). Стволовые клетки изолировались из собственной крови пациента после назначения препарата для стимуляции производства стволовых клеток костным мозгом и выделения их в кровь. После наблюдения в течение 1 года, 18 пациентов продемонстрировали улучшение электрофизиологической проводимости, которая в некоторых случаях привела к функциональному улучшению.

2) Др. Андрей Брюховецкий (Россия), бывший директор отделения неврологии Российского Военно-Морского флота, занимался трансплантацией, как эмбриональных/фетальных стволовых клеток, так и аутологичных (т.е. собственных клеток пациентов) взрослых стволовых клеток пациентам с хронической ТСМ. Кроме того, ряду пациентов Брюховецкий проводил трансплантацию аутологичных клеток обонятельной выстилки носа (КОВ), с использованием процедур, разработанных британским ученым, д-ром Джеффри Райзманом. Хотя КОВ и не являются стволовыми клетками, однако, обладают значительным регенеративным потенциалом, и находятся в фокусе внимания ученых, изучающих ТСМ.

Брюховецкий больше не применяет эмбриональные/фетальные стволовые клетки из-за этической неоднозначности вопроса об их использовании, возможности отторжения и, что важнее всего, его веры, что аутологичные, взрослые стволовые клетки более эффективны.

Процедуры по клеточной трансплантации, проводимые Брюховецким, можно разделить на следующие категории:Фетальные клетки: В 1996 году Министерство Здравоохранения России поручило Брюховецкому выполнить ограниченные клинические исследования по ТСМ. В этих исследованиях 17 пациентам с ТСМ были произведены трансплантации стволовых клеток, нейронов и глии, полученных из различных тканей, включая 12-недельный плод человека. Возраст пациентов колебался в пределах 16-52 (в среднем 30) лет, и период между травмой и трансплантацией варьировался от 1 года до 20 лет. У шести пациентов был шейный уровень повреждения, у десяти – грудной, и у одного – поясничный. Помимо клеточной трансплантации, все получили набор дополнительных процедур, в зависимости от их повреждения.

До лечения, у 14 пациентов состояние по шкале ASIA соответствовало группе А (меньше функций сохранено), у троих – группе В. После трансплантации (0,5-3 года наблюдения), четыре пациента относились к группе А, пятеро – к группе В  и семеро – к С. У пятнадцати наблюдалось улучшение чувствительности, у семи – моторное улучшение, у 12 улучшилась функция мочевого пузыря. Before treatment, 14 subjects were ASIA-grade A (most paralyzed) and three were grade B. After transplantation (0.5 - 3-year follow-up period), four were grade A, five grade B, and seven grade C.  Fifteen had sensory improvement, seven had motor improvement, and 12 had improved bladder function.

СфероГель и аутологичные клетки: Команда Брюховецкого произвела имплантацию СфероГеля (биодеградируемый полимерный матрикс) с клетками шести пациентам, нуждающимся в реконструктивных оперативных вмешательствах. Трем пациентам были имплантированы гемопоэтические стволовые клетки (клетки, полученные из костного мозга путем выгонки в кровь), трем другим – клетки обонятельной выстилки. За время наблюдения (3-8) месяцев два пациента группы А перешли в группу С, один пациент перешел в группу В. У одного пациента из группы В улучшения отсутствовали.

Интратекальные трансфузии стволовых клеток: Интратекальные трансфузии гемопоэтических стволовых клеток применяются в настоящий момент чаще всего. В этой относительно прямолинейной процедуре без хирургического вмешательства, стволовые клетки собираются у пациента без анестезии и хранятся с сохранением их жизнеспособности до введения пациентам.

Для стимулирования выделения стволовых клеток и их накопления в крови, пациенты обычно получают восемь подкожных инъекций гранулоцитарного колониестимулирующего фактора, также известного, как нейпоген^® или филграстим, в течение 4 дней. На пятый день пациента подключают к сепаратору крови. В течение  3-4 часов кровь забирается из вены, обрабатывается в сепараторе, который изолирует стволовые клетки, и затем вводится через другую вену.

Собранные стволовые клетки концентрируются при помощи центрифуги и медленно замораживаются в жидком азоте (-170 ⁰ Цельсия) с добавлением диметилсульфоксида (ДМСО), криоконсервирующего вещества, позволяющего заморозить клетки с минимальными потерями их свойств. Также проверяется наличие инфекций, чтобы избежать их попадания во время трансфузии за защитный гематоэнцефалический барьер.  

Перед трансфузией суспензия стволовых клеток оттаивается, и, примерно, 5,3 миллиона клеток вводится интратекально в субарахноидальное пространство (т.е. в спинномозговую жидкость) посредством люмбальной пункции L3-4 с использованием местной анестезии. Процедура занимает немного времени и  довольно проста. Повторно клетки можно будет вводить через два месяца. Брюховецкий считает, что большое число трансфузий способствуют функциональному восстановлению.

При интратекальных трансфузиях клеток обонятельной выстилки, изолированных из назальной ткани пациента и прокультивированных, заметных положительных результатов получено не было, в отличие от трансфузий гемопоэтических стволовых клеток.  

Хотя в клинике Брюховецкого на момент написания данного материала клетки были собраны примерно у 120 человек, только около 60 человек, по различными причинам, включая наличие латентных инфекций, получили трансфузии клеток. Из этих 60 человек, 18 получили несколько трансфузий, согласно рекомендациям. В свою очередь, из 18 человек, 61% продемонстрировали функциональное восстановление, в некоторых случаях, значительное.

Поскольку большая часть пациентов получили трансфузии сравнительно недавно, было преждевременно проводить оценку долгосрочного эффекта. Улучшения, наступившие быстро скорее всего вызваны не сравнительно медленной регенерацией нейронов или процессом ремиелинизации, а изменением окружающей среды места повреждения под воздействием секреции факторов роста и других молекул.

3) Др. Самуил Рабинович и коллеги (Россия) занимались трансплантацией различных комбинаций фетальных КОВ, клеток нервной и гемапоэтической тканей, и фрагментами спинного мозга в место повреждения 15 пациентам. Возраст пациентов колебался от 18 до 52 лет, период после травмы – от одного месяца до шести лет. У всех полный перерыв группы А согласно классификации Франкеля (которая к сегодняшнему дню включена в шкалу ASIA). Каждый из пациентов получил от одной до четырех трансплантаций клеток в разное время, и наблюдался в течение, по крайней мере, 1,5 лет. Улучшения были отмечены у 11 из 15 пациентов. Шесть пациентов перешли в группу С (неполный перерыв), пять обрели способность ходить с костылями. В целом, у пациентов с меньшим сроком после травмы результаты лучше.

Согласно обновленным данным, опубликованным на вебсайте ученых, 102 пациента подверглись процедуре, в ходе которой место повреждения наполнялось гелем с фетальными стволовыми клетками. Вслед за первоначальной трансплантацией последовали еще одна или более трансплантации клеток в субарахноидальное пространство, под мембрану спинного мозга. Период между травмой и хирургической трансплантацией варьируется от нескольких месяцев до пяти лет. Исходы 56 пациентов, наблюдавшихся в течение хотя бы двух лет, представлены в таблице ниже. Как можно увидеть, спустя два года после лечения, только 18% пациентов осталось в группе наиболее тяжелого повреждения, по сравнению с 75% до начала лечения. Исследователи надеются, что, поскольку восстановление после лечения протекает медленно, то эти статистические данные будут улучшаться со временем. Однако, нужно отметить, что значительное число пациентов получили лечение в тот период, когда восстановление функций происходит независимо, без дополнительных вмешательств.

4) Др. К-С Канг и др. (Южная Корея) ввел стволовые клетки пуповинной крови (КПК) в область повреждения 37-летней женщине, получившей полное повреждение спинного мозга на грудном уровне 19 лет назад в результате падения. В отличие от эмбриональных аналогов, природа стволовых клеток пуповинной крови не является спорной. Также риск их отторжения значительно меньше, чем у большинства других аллогенных (т.е. полученных у генетически отличных людей) донорских тканей, за исключением эмбриональных, т.е. необходимо некоторое, не обязательно полное, соответствие донора реципиенту.

В данном случае пуповинная кровь человека была получена из банка крови, клетки были изолированы в течение 24 часов, и прокультивированы в среде. Исследователи указали, что при выращивании на нейрогенной среде, клетки проявили характеристики, свойственные нейронам и клеткам нейронной поддержки ( т.е.глиальным).

После ламинеэктомии, один миллилитр, содержащий один миллион клеток, был введен «в субарахноидальное пространство наиболее дистальной части здорового спинного мозга». Дополнительно один миллион клеток был введен «диффузно в интрадуральное и экстрадуральное пространство поврежденного спинного мозга».

Исследователи сообщили, что у пациентки восстановились некоторые функции нижних конечностей в течение 41 дня после трансплантации, включая способность к хождению с опорой на ходунки. Различные  электрофизиологические исследования подтвердили эти наблюдения. Ученые считают, что введение клеток непосредственно в спинной мозг более эффективно, чем вливание их в спинномозговую жидкость. Они также не исключают, что функциональное восстановление произошло благодаря декомпрессии спинного мозга, связанной с оперативным вмешательством.

К сожалению, после второй трансплантации клеток состояние пациентки значительно ухудшилось. На данный момент она не может долго находиться в сидячем положении и большую часть времени проводит в постели. По ее словам, «улучшения быстро исчезли. Я подверглась повторному лечению, и вот результат. Я не могла двигаться и страдала от сильных болей». Врачи предполагают, что пациентка получила инфекцию во время второй процедуры, либо из-за отдельных аспектов самой процедуры, либо из-за бактериального заражения трансплантируемых клеток. В результате чего, окружающие ткани затвердели.

5) Др. Юн Ха и др. (Южная Корея) трансплантировал клетки костного мозга (ККМ) в место повреждения пациентов с острой ТСМ (7-14 дней после травмы) в сочетании с гранулоцитарно-моноцитарным колониестимулирующим фактором (ГМКСФ), фактором, стимулирующим производство стволовых клеток. Клетки костного мозга были забраны методом аспирации из подвздошной кости (т.е. кости бедра) и обработаны. Поскольку эти аутологичные клетки взяты у самого пациента, вероятность отторжения отсутствует. После ламинэктомии одним позвонком выше и ниже места контузии, было введено 1,8 мл пасты с клетками костного мозга в шесть точек рядом с местом повреждения.

Все пациенты – мужского пола, в возрасте от 17 до 51 года. У пяти пациентов – шейный уровень повреждения, у одного – грудной, все относятся к группе А по шкале ASIA, т.е. полное повреждение. Пятеро получили клетки костного мозга и ГМКСФ, один получил только ГМКСФ.

ГМКСФ  вводился подкожно в течение первых пяти дней каждого месяца, пять месяцев. Помимо стимуляции пролиферации стволовых клеток костного мозга, эксперименты на животных позволили предположить, что ГМКСФ может 1) активировать макрофаги (иммунные клетки) для удаления налета миелина, ингибирующего регенерацию аксонов, и 2) ингибировать посттравматическую гибель клеток, именуемую апоптозом.

Хотя улучшения чувствительности были отмечены сразу после процедуры, восстановление чувствительности в области крестца и значительные моторные улучшения наблюдались в последующий период от трех недель до семи месяцев. Четверо пациентов, включая получившего только ГМКСФ, перешли из группы А, полный перерыв, по шкале ASIA, в группу С, неполный перерыв, один перешел из группы А в группу В, один остался в группе А. Результаты МРТ, сделанных в течение 4-6 месяцев после травмы показали небольшое улучшение.

Ученые пришли к выводу, который является целью исследования, что помимо повышения температуры, вызванной введением ГМКСФ, другие серьезные осложнения при трансплантации ККМ отсутствуют. Поскольку данное вмешательство и последующие оценочные мероприятия проводились относительно вскоре после травмы, когда естественное функциональное улучшение происходит довольно часто, ученые осторожны в своих заключениях относительно общей эффективности метода. Однако, они цитируют исследования, демонстрирующие, что только относительно небольшое количество пациентов (~6%) перешло из группы А шкалы ASIA в группу В.

Позднее ученые сообщили о результатах более экстенсивного исследования, в котором 35 пациентов с полной ТСМ получили трансплантацию аутологичных стволовых клеток костного мозга, сопровождаемую стимулирующим использованием ГМКСФ. Пациенты данного исследования сравнивались с 13 пациентами с ТСМ, получившими более традиционное лечение без трансплантации стволовых клеток. Семнадцать человек получили трансплантацию клеток в течение 14 дней после травмы, шесть – в период от 2 до8 недель, и двенадцать пациентов – спустя 8 недель. В среднем период наблюдения составил 10,4 месяцев. Улучшение было отмечено в 30,4% ранее леченых пациентов (т.е. пациентов в острой и подострой стадии травмы, не в хронической стадии).

6) Др. Ева Сыкова и коллеги (Республика Чехия) произвели имплантацию аутологичных стволовых клеток костного мозга, собранных из подвздошной кости, 20 пациентам. У восьми травма была подострая, они получили лечение в течение 10-33 дней после травмы; у 12 травма была хроническая, получили лечение 2-18 месяцев после травмы. Клетки, вскоре после забора, вводили пациентам через позвоночную артерию или внутривенно. Пациенты с подострой травмой: четверо получали клетки обоими способами; хронические больные: двое получили клетки через артерию, десять – внутривенно. Динамику восстановления у пациентов периодически оценивали различными электрофизиологическими методами и шкалой ASIA. Прогресс был отмечен 1) у всех пациентов с подострой травмой, получавших клетки через позвоночную артерию, и только у одного пациента, получившего клетки внутривенно, и 2) один из двух хронических больных, получивших клетки через позвоночную артерию. Среди пациентов, показавших улучшение по результатам шкалы ASIA, многие перешли из группы А в группу В, и один пациент из группы В в D (группа А соответствует максимальной степени паралича, Е – полное выздоровление). Хотя Сыкова очень осторожна в интерпретации этих предварительных результатов, она считает, что данный метод приносит больше результатов при применении непосредственно после травмы и при введении через позвоночную артерию, что позволяет ввести клетки ближе к месту повреждения.

7) Др. Корнелис Кляйнблозем создал компанию, занимающуюся стволовыми клетками «Селлз фор Хелс» (Cells4Health, или C4H). Головной офис компании находится в Нидерландах, но в компании изначально использовались турецкие больницы и персонал. Программа C4H занимается сбором клеток костного мозга у пациентов посредством пункции подвздошной кости, где сконцентрировано большое количество костного мозга. Затем клетки костного мозга подвергаются обработке запатентованным методом.

Далее клетки вводятся в спинной мозг в области повреждения при помощи 20-40 микроуколов. В целом, ниже, выше и вокруг места повреждения инсулиновым шприцем водится около двух миллилитров препарата стволовых клеток, что соответствует 10-20 миллионам клеток. Позднее в других случаях клетки также вводились интратекально (в канал спинного мозга) или внутривенно.

По меньшей мере, 18 пациентов с ТСМ были пролечены по данной программе C4H. Из первых девяти пролеченных больных с хронической ТСМ, восемь показали хорошие результаты. У трех из первых четырех пролеченных, результаты МРТ показали, что размер повреждения сократился вполовину спустя три месяца после операции, что предполагает создание новых нейральных клеток  и поддерживающих структур.

Предпложительно трансплантация клеток восстановила ряд функций и чувствительность у трех из четырех первых пациентов. Согласно утверждениям ученых, через два-три месяца после трансплантации первый пациент с полным повреждением на Т6 уровне, полученным в автоаварии четыре года назад, восстановил функции до уровня T12- L1, и способен двигать ногами, пройти несколько шагов с ходунками и стоять. Второй пациент, с полным повреждением на уровне C5-6, полученным 6 месяцев назад, через полтора месяца после операции смог двигать ногами, пальцами рук, смог ощущать пальцы ног и восстановил ректальную чувствительность и чувствительность мочевого пузыря. Через несколько месяцев после трансплантации, третий пациент, с полной ТСМ, полученной 9 месяцев назад в результате хирургического осложнения, восстановил способность стоять, ходить на ходунках в ортезах и писать. Также у этого пациента чувствительность приблизилась к норме и он восстановил ректальные функции. У четвертого пациента прогресс отсутствовал, возможно, из-за того, что у больного наблюдался полный физиологический перерыв спинного мозга, а не компрессия.

Основные результаты исследования были опубликованы C4H, чье дальнейшее существование зависит от получения положительных результатов. Независимые источники описывают  менее перспективную ситуацию, согласно которой многие пациенты не только не восстановили, но и потеряли некоторые функции.

Недавно Кляйнблозем и коллеги основали клинику XCell-Center, находящуюся в Германии, где проводится множество сходных процедур для ряда заболеваний, включая ТСМ. Костный мозг с большим количеством клеток получается из кости бедра пациента, стволовые клетки костного мозга подвергаются обработке и трансплантируются в поврежденный спинной мозг пациента после ламинэкомии или с помощью менее инвазивной люмбальной пункции в спинномозговую жидкость. Ученые заявляют о 60% успехе в восстановлении некоторых функций.

8) Др. Йонгфу Жанг и коллеги (Китай) произвели трансплантацию аутологичных (т.е. взятых у самого пациента) стволовых клеток костного мозга у 90 пациентов с острой и хронической ТСМ. Из этих пациентов, 10 имели шейный уровень травмы, 62 – грудной и 18 – поясничный. Время после травмы варьировалось от 3 дней до 6 лет. «Инъекции делались в область между повреждением и здоровым спинным мозгом, выше и ниже повреждения».

У 33 пациентов улучшилась чувствительность и у 11 – мышечные функции, согласно шкале по Франкелю. Все пациенты с улучшениями в клинической картине получили травму не позднее, чем за год до процедуры трансплантации. Лечение вскоре после травмы сопрягается с лучшими результатами. Ученые предполагают, что стволовые клетки костного мозга улучшают циркуляцию крови и ингибируют формирование глиального шрама в месте повреждения.

9) Согласно публикациям в прессе, Др. Венцеслав Буссарский (Болгария) пролечил 12 пациентов с ТСМ аутологичными стволовыми клетками, изолированными из костного мозга тазовой и грудной костей пациента.

10) «Адвансд Селл Терапьютикс» (Advanced Cell Therapeutics (ACT). Согласно информации на их Интернет сайте, компания АСТ, зарегистрированная в Карибском островном государстве Тёркс и Кайкос, имеющая связи в Южной Африке, предоставляет доступ к терапии стволовыми клетками пуповинной крови там, где данное лечение является законным…» Согласно указанным источникам информации, данные протоколы стволовых клеток пуповинной крови применялись более 700 раз для лечения более 70 заболеваний, включая ТСМ. В прессе было опубликовано большое количество негативных материалов по вопросам происхождения клеток и операций, проводимых АСТ.

По словам АСТ, терапевтическая эффективность их препаратов стволовых клеток была усилена при помощи ряда процедур. Во-первых, эритроциты и лейкоциты крови удаляются для снижения риска отторжения. Во-вторых, количество ключевых клеток CD133+ в пуповинной крови наращивается от нормального уровня 10% до 70-80%. Клетки CD133+ , также как стандартные клетки CD34+ считаются особенно действенными стволовыми клетками, благодаря их способности настраиваться на целевую ткань, дифференцироваться и приживаться. В-третьих, АСТ разработали процедуры для дифференциации стволовых клеток пуповинной крови на более специализированные виды, такие как, нейрональные стволовые клетки для регенерации спинного и головного мозга, или панкреатические стволовые клетки для лечения диабета. Кроме того, предположительно, компания разработала технологии замораживания клеток, которые усиливают жизнеспособность клеток после размораживания.

Компания АСТ сообщила о лечении восьми пациентов с хронической ТСМ препаратами стволовых клеток, полученных из пуповинной крови. Возраст пациентов варьировался от 18 до 43; у пяти была квадриплегия, у трех – параплегия; повреждения в основном были неполными. Пациентам внутривенно и/или  подкожно вводилось около 1,5 миллионов стволовых клеток. После относительно недолгого периода наблюдения, большинство пациентов отмечали некоторые функциональные улучшения, включая улучшение чувствительности, способности ходить и функций дефекации и мочеиспускания.

11) Др. Эмилио Жак (Мексика) занимался трансплантацией стволовых клеток пуповинной крови в место повреждения. Исходя из имеющейся, достаточно скудной информации, процедуры Жака, по-видимому включали в себя удаление рубцовой ткани лазером, декомпрессию спинного мозга, введение стволовых клеток в область повреждения и размещение жировой ткани, полученной у пациента, поверх места повреждения, чтобы минимизировать формирование рубцовой ткани. После процедуры в близлежащие мускулы ежемесячно вводились стволовые клетки. Согласно источникам, Жак также занимался трансплантацией эмбриональных стволовых клеток.

Один пациент с повреждением на уровне Т5-9, полтора года между травмой и лечением, рассказал нам о некоторых функциональных улучшениях, наступивших примерно три месяца после операции. А именно, граница поверхностной чувствительности спустилась на 5 см ниже уровня Т9 и граница глубокой чувствительности спустилась ниже до линии талии. Более того, он смог самостоятельно крутить педали велосипеда более 30 минут, двигать бедрами, толкать 11кг ногами и выбрасывать ноги вперед в снаряжении на тредмилле.

Процедуры со стволовыми клетками, производимые Жаком были представлены в докладе на Международном Конгрессе Хирургов в 2005 году в Акапулько, Мексика. Согласно представленной информации он имплантировал неопределенные стволовые клетки «точно в зону повреждения спинного мозга, в сочетании с послеоперационным применением нейромышечной реабилитации, электроакупунктуры, инфракрасного лазера и 4АР» (см. дальнейшее обсуждение).  

Из 59 пациентов (средний возраст 21), 51% - мужчины, 49% - женщины; у 50 – неполный перерыв, у 9 – полный; 52% - травма на шейном уровне, 38% - на грудном и 10% - на поясничном уровне. Жак сообщил, что у 68% произошло улучшение чувствительности и моторики, а 16% остались на прежнем уровне. « Наилучшие результаты наблюдались у пациентов с более низким уровнем повреждения, в более молодом возрасте и с наименьшим временным периодом после травмы».

12) Медра, Инк.  Представили программу лечения большого спектра неврологических, включая ТСМ, и других заболеваний, с помощью фетальных стволовых клеток. Хотя головной офис компании находится в Калифорнии, операции выполняются в Доминиканской Республике. Забор клеток производится из 8-12 недельного абортивного материала. Фетальные гемопоэтические клетки, по-видимому, вводятся внутривенно, а фетальные нейрональные стволовые клетки – подкожно в лимфатические узлы. В программе утверждается, что клетки будут мигрировать к тем зонам, где они необходимы, а также выделять факторы роста, необходимые для восстановления функций.

13) Др. Гита Шрофф (Индия) использовала эмбриональные стволовые клетки человека (ЭСК) для лечения сотен больных, включая ТСМ. Достигнуты достаточно значительные результаты, и что особенно важно, если учесть теоретический риск ЭСК, побочные эффекты отсутствовали.

Все клетки, множество раз трансплантировавшиеся многим пациентам, были получены из одного искусственно оплодотворенного яйца из программы Шрофф по оплодотворению in vitro. Яйцо делится с разрешения донора, и затем, как правило, утилизируется. Успех Шрофф в значительной степени был облегчен обширным опытом работы с эмбриональными клетками в качестве врача, занимающегося оплодотворением. При осуществлении искусственного оплодотворения она добилась 70% успешных результатов, что является высоким показателем, по сравнению с другими программами. По-видимому, опыт, приобретенный при выращивании здоровых эмбрионов, был успешно переведен в плоскость создания высокоэффективных стволовых клеток. Клетки подготовлены в соответствии со стандартами контроля качества GMP (Good Manufacturing Practice) и GLP (Good Laboratory Practice).

Ключевой момент деятельности Шрофф заключается в том, что она выращивает ЭСК без использования каких-либо продуктов животного происхождения, в том числе питающих клеток животного происхождения, которые используют многие ученые. Полностью сохраняя «человеческую» природу клеток, клетки тем самым становятся более пригодными к трансплантации. Клетки «материнской» культуры дальше адаптируются или примируются для создания дочерних культур, направленных на специфические заболевания. Соответственно, предполагается использовать более специализированные клеточные линии для лечения больных диабетом, ТСМ, инсультом и т.д. По мнению Шрофф, трансплантированные клетки будут направляться именно в ту ткань, где они необходимы. То есть, при внутреннем или внутримышечном введении клеток, физиологическое сходство клеток с целевой тканью заставит их мигрировать туда, где они нужны.

Согласно Индийским рекомендациям по использованию стволовых клеток использование ЭСК клеток разрешается, если состояние или заболевание считается неизлечимым, Учитывая  черепашью скорость развития методов лечения при помощи стволовых клеток в большинстве стран, данные рекомендации представляются весьма благоразумными.

В ответ на критику, упрекающую ее в использовании беззащитных и беспомощных людей в качестве подопытных кроликов, Шрофф отмечает, что 30% ее пациентов либо сами являются врачами, либо имеют членов семьи с медицинским образованием. Другими словами, высокообразованные медицинские специалисты, которые могут оценить как суть выбранного метода, так и пользу. Кроме того, лечение получили также члены руководства страны, и согласно их комментариям для автора, они довольны достигнутым эффектом. Документируя интерес к ее программе на самом высоком уровне, Шрофф упоминает Президента и премьер-министра Индии. Также,  тот факт, что многие из неимущих пациентов были пролечены бесплатно, убедительно доказывает, что ее программа не является лишь коммерческим начинанием.  

Шрофф пролечила около 70 пациентов с ТСМ. Хотя она считает, что лечение будет оптимальным, если оно начато вскоре после травмы, у большинства ее пациентов со времени получения травмы прошло не меньше года. Она решила больше не лечить острые травмы из-за того, что критики ее метода лечения будут отрицать достигнутые улучшения, объясняя их естественным прогрессом, который произошел бы в любом случае в течение периода, когда подобное восстановление происходит достаточно часто.

Пациенты часто посещали клинику по нескольку раз для серии трансплантаций. Клетки вводились разными способами, включая внутривенный или внутримышечный, и реже всего применялись интратекальные трансплантации непосредственно в область спинного мозга. Количество трансплантируемых клеток со временем возросло. Все пациенты тщательно наблюдаются для документирования прогресса.

Один из наиболее хорошо известных пациентов Шрофф – Аджит Йоги, 60-летний член парламента и бывший главный министр одного из Индийских штатов, получивший травму спинного мозга на шейном уровне в автомобильной аварии в 2004 году. После травмы, Йоги не мог сидеть, дышал и писал с трудом. После лечения он способен пройти 10 шагов в ортезах, значительно восстановил функции мочеиспускания и дефекации, полностью, вплоть до пальцев на ногах восстановилась чувствительность, и он с новой энергией возобновил свой деловой образ жизни политика.

14) Др. Сатиш Тоти и коллеги (Индия) стал инициатором пилотного исследования, направленного на оценку эффективности трансплантации собственных (т.е. аутологичных) мезенхимальных стволовых клеток пациента, полученных из костного мозга. Забор клеток осуществлялся из кости бедра, затем перед трансплантацией клетки культивировались в течение нескольких недель. У 22 пациентов, включенных в исследование, был полный перерыв спинного мозга (ASIA А), на уровнях с С4 по Т10, полученный не позднее, чем за полгода до лечения. Вводится приблизительно 1 млн клеток на килограмм массы тела, относительно неинвазивным способом – люмбальная пункция – в спинномозговую жидкость. Чтобы оценить потенциальные изменение после различные электрофизиологические, клинические и томографические исследования проводились до транслпантции и через 3 месяца после.

К моменту написания данной работы, в исследование было включено 12 человек, из которых один уже прошел обследование через три месяца после процедуры. Этот пациент, 32-летний мужчина, изначально получил две трансплантации стволовых клеток, между которыми прошло две недели. Помимо улучшений, зарегистрированных разными электрофизиологическими методами, пациент сообщил об улучшении функций дефекации и мочеиспускания, улучшении чувствительности; улучшении мышечных функций и силы, включая движения пальцев ног и некоторое передвижение на ногах, а также общее увеличение сил.

15) Др. Роберт Троссель  (Нидерланды) лечил пациентов с ТСМ стволовыми клетками пуповинной крови, предоставленными компанией АСТ. Хотя подробностей известно немного, одна из статей, представленных в прессе, вкратце описала лечение у Тросселя женщины с высоким уровнем повреждения. В этом случае 1,5 миллиона стволовых клеток были введены женщине внутривенно в основание черепа, где и была у нее травма, и ниже в пять других областей по сторонам шеи. Метод лечения Тросселя вызвал полемику.

16) Компания Биотехнологий Бейке (Китай) пролечили стволовыми клетками, в основном клетками пуповинной крови, сотни пациентов с разными неврологическими заболеваниями,  Клетки Бейке трансплантируются пациентам рядом клиник в Китае и Таиланде, и также существуют планы расширения по всему миру.

В целом, «Бейке» предпочитают лечить пациентов с неполным перерывом. По словам основателя компании «Бейке», Д-ра Сеана Ху: «Травмы спинного мозга очень интересны, потому что они противоречат правилу «Чем раньше, тем лучше». Мы обнаружили, что один из наших самых лучших результатов достигнут в случае травмы со сроком давности более 20 лет… По нашим наблюдениям отклик на терапию у таких больных лучше, чем  у пациентов с травмой не позднее шести месяцев. В результате мы не поддерживаем госпитализацию больных с травмой, полученной менее шести месяцев назад.»

Опыт лечения нескольких пациентов с неполным перерывом на уровне С5-6 показал следующее:

В первом случае, 27-летний мужчина из США получил лечение примерно через 2,5 года после травмы. Стволовые клетки пуповинной крови вместе с фактором роста нервов были введены выше и ниже места повреждения (т.е.хирургическая имплантация) в сочетании с декомпрессией (см. ниже). Клетки также вводились интратекально (в спинномозговую жидкость) или внутривенно. После процедуры у пациента возросла мышечная сила, улучшились функции в руках и нога, общая чувствительность, а также улучшилось потоотделение, крайне важный аспект для пациента, так как он проживает во влажном и жарком климате Флориды.

Второй пациент – 27-летний мужчина из Румынии, получивший травму за 11 лет до начала лечения во время дайвинга. В отличие от предыдущего случая, пациенту вводилась смесь стволовых клеток пуповинной крови с фактором роста нервов только через спинномозговую жидкость и внутривенно (т.е. хирургическая имплантация отсутствует). Относительно скоро после процедуры у пациента появилась новая чувствительность по телу, возросла мышечная сила, и появились движения в ругах и ногах, стали сильнее мышцы живота и спины, также улучшилась функция мочеиспускания и дефекации.

17) Др. Густаво Мовилья и др. (Аргентина) пролечил двух человек мезенхимальными стволовыми клетками, трансформированными в нейральные стволовые клетки при культивации с аутоиммунными клетками, полученными у пациента.

В этой программе, мезенхимальные стволовые клетки были получены из костного мозга подвздошной кости пациента, т.е. из того места, где сконцентрировано большое количество костного мозга. Стволовые клетки, называемые мастерами на все руки, обладают потенциалом дифференцироваться на различные типы клеток. После дальнейшей очистки, эти стволовые клетки были трансформированы в нейральные стволовые клетки при помощи совместного культивирования с аутоиммунными клетками, ранее изолированными у пациента. Поскольку все клетки взяты у самого пациента (т.е. аутологичные), возможность отторжения отсутствует.

До трансплантации стволовых клеток, ранее изолированные аутоиммунные клетки внутривенно вводились пациенту. Эти инфузии примировали место повреждения, вызвав воспалительную реакцию, создавая более восприимчивую окружающую микросреду для вводимых стволовых клеток. Через два дня, обработанные мезенхимальные/нейрональные стволовые клетки вводились в артерию, обслуживающую область места повреждения.

Первым пациентом был 19-летним мужчиной, получившим травму на уровне Т9 в автоаварии за 8 месяцев до начала лечения. Ему сделали два введения стволовых клеток, с интервалом в три месяца. Электрофизиологические исследования показали улучшение проводимости нервных окончаний через место повреждения, МРТ показало увеличение диаметра спинного мозга. После повторного введения координация движений и способность ходить улучшились. Согласно докладам, пациент восстановил функции до уровня S1.

Вторым пациентом был 21-летняя женщина с травмой на шейном уровне C3-5, полученной в автомобильной аварии за 30 месяцев до начала лечения. После одной процедуры, и МРТ и электрофизиологическое исследование показали наличие улучшения, а пациентка восстановила силу и контроль в верхней части тела, включая функции рук. Согласно докладам, она восстановила функции до уровня T1-2.

18) Др. Р. Рави Кумар и коллеги (Индия) трансплантировал аутологичные (т.е. полученные у самого пациента) стволовые клетки более 120 пациентам с ТСМ. Препарат стволовых клеток создавался в сотрудничестве с Ничи-Ин Центром Регенеративной Медицины (Nichi-In Center for Regenerative Medicine), японской лабораторией, находящейся в Индии и специализирующейся на препарате аутологичных стволовых клеток. Стволовые клетки  экстрагировались из 100 мл костного мозга, полученных у пациентов. Концентрированный препарат, содержащий около 2-4 миллионов клеток, вводился пациентам в спинномозговую жидкость (т.е. интратекально).

Согласно презентациям, представленным на конференциях и встречах в 2007 году, 120 пациентов, получивших трансплантацию клеток указанными методом, находились под наблюдением врачей в течение шести месяцев. Из указанной группы пациентов 85 были мужского пола и 35 женского; возраст варьировался в пределах 8-55 лет; время  после травмы – от 3 месяцев до 11 лет. У девяти пациентов повреждение было на шейном уровне, у 38 – на грудном (T1-T7), 60 – нижнегрудном (Т7-Т12) и 12 – на поясничном уровне.

Через шесть месяцев после трансплантации, 12 и 8 пациентов показали улучшение моторной силы, сменив уровень на два или на один соответственно (при этом более выраженный прогресс отмечается для более низких уровней повреждений); трое смогли ходить самостоятельно; у 14 повысилась чувствительность или уменьшилась боль; и  у 18 улучшилась функция мочеиспускания.

19) Др. Луис Джеффнер (Эквадор) и коллеги на 13 Ежегодной встрече Международного Общества Клеточной терапии доложили о лечении 25 пациентов стволовыми клетками, полученными из собственного костного мозга пациентов (т.е. аутологичными). Период между получением травмы до лечения составил от 0,5 месяца до 22 лет ( в среднем 4 года). Как везде указывалось, значительный функциональный прогресс зачастую достижим без какого-либо вмешательства в течение первого года после травмы.  

Пациентам имплантировалось около 1,2-миллионов стволовых клеток на килограмм массы тела, и через 4-7 дней было начата длительная реабилитация. Прогресс оценивался различными методами, включая электрофизиологические методы оценки нервной проводимости, МРТ, оценки функционирования мочевыделительной системы, оценки спастики, способности ходить, а также по шкале ASIA. По словам исследователей: «Пациенты продемонстрировали улучшение чувствительности, функции дефекации и мочеиспускания, и даже контроля сфинктеров, эрекции и эякуляции. Пятнадцать пациентов (60%) стали стоять, 10 (40%) ходить с ортезами в упоре на брусьях, и 4 (16%) смогли ходить с костылями». Хотя не очень понятно, как сравнивать эти данные с функциями до лечения, показатели ASIA значительно улучшились после вмешательства. Побочные эффекты отсутствовали, ни один пациент не ощутил ухудшения от лечения.

20) Врачи в  Клинике Тиантан Рухуа, Пекин, Китай сообщают о трансплантации аутологичных (т.е. изолированных у пациента) стволовых клеток, полученных из костного мозга шести пациентам с ТСМ, из которых пятеро имели хроническую травму, полученную не меньше одного года назад. Учитывая формирование глиального шрама на месте повреждения, как преграду для регенерирующих нейронов, врачи, удаляют рубец «лекарством» до введения клеток. Клетки выращиваются и размножаются в культуре в течение около 3-4 недель, в итоге получается около 4 000 000 клеток, которые затем трансплантируютя больному в спинномозговую жидкость  при помощи люмбальной пункции или же имплантируются напрямую в поврежденный спинной мозг хирургическим методом.

TOP